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液相色譜儀的正相色譜與反相色譜的區別是什么呢?

發布時間:2020-08-17   點擊次數:474次
     在液相色譜儀分析中,根據流動相和固定相相對極性的不同,可分為正相色譜和反相色譜。所謂正相色譜是指固定相極性大于流動相極性的情況,反之,固定相的極性小于流動相的極性,則稱為反相色譜。正相色譜與反相色譜的區別是什么呢?
  由于極性化合物更容易被極性固定相所保留,所以正相色譜系統一般適用于分離極性化合物,極性小的組分先流出。相反,反相色譜系統一般適用于分離非極性或弱極性化合物,極性大的組分先流出。因此在應用上,正相色譜用于分離極性較大的物質,如蛋白質、生物堿等。反相色譜多用于分離極性較小的物質,在流動相的選擇上,反相色譜的優勢更大,在實際工作中反相色譜的應用更為廣泛。
  正相色譜用的固定相通常為硅膠,以及其他具有極性官能團,如胺基團和氰基團的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基或其他團的極性較強,因此,分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小,即極性弱的組份先被沖洗出色譜柱。 
  反相色譜填料常是以硅膠為基礎,表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。反相色譜填料常是以硅膠為基礎,表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。反相液相色譜柱效高、分離能力強、保留機理清楚,是液相色譜分離模式中使用廣泛的一種,對于生物大分子、蛋白質及酶的分離分析,反相液相色譜正受到越來越多的關注.反相色譜法是表面非極性載體為固定相,以比固定相極性強的溶劑為流動相的一種液相色譜分離模式.反相色譜固定相大多是硅膠表面鍵合疏水基團,基于樣品中的不同組分和疏水基團之間疏水作用的不同而分離.
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